Аналізи крові на сифіліс: види діагностики, алгоритм проведення, розшифровка результатів

Сифіліс – інфекційне венеричне захворювання, що викликається спірохетами блідої трепонеми. Шляхи передачі: при сексі, від матері до плоду, трансфузійної, і значно рідше – через рани на шкірі, які вступають в контакт з інфекційними ураженнями. Залежно від стадії, виділяють первинний, вторинний, латентний і третинний сифіліс.

Мікроскопія в темному полі

Блідітрепонеми не можуть рости на поживних середовищах і не візуалізуються під світловим мікроскопом. Так як виявлення патогена за допомогою звичайної мікроскопії неможливо, застосовують спеціальний мікроскоп з темним полем, де збудник видно у вигляді спіралі на темному тлі.

Для проведення мікроскопії забирається біоматеріал з підозрілого на захворювання вогнища. Мікроскопія в темному полі – це можливий спосіб оцінки шкірних поразок, таких як шанкр первинного сифілісу або кондилома вторинного сифілісу. Якщо матеріал макулопапулезного вогнища сухий, досліджують аспірат лімфатичного вузла.

Негативний результат не виключає патологічний процес, статистично виявлення збудника можливо тільки в 80%.

Біоматеріал для аналізу може бути будь-яким: кров, вміст сифилида, спинномозкової рідини та ін. Тест підходить для інкубаційного періоду.

ПЛР повністю специфічна.

Непрямі серологічні аналізи на сифіліс: трепонемні і нетрепонемні тести

Серологічні аналізи (КСР або комплекс серологічних реакцій) вважаються найбільш поширеним способом для діагностики всіх стадій сифілісу. Виділяють наступні реакції:

• аглютинації;
• преципітації;
• імунофлюоресценції;
• імуноферментний аналіз та ін.

Також серологічні аналізи на сифіліс поділяють на трепонемні і нетрепонемні.

При підозрі на набутий сифіліс виконують скринінгове тестування, для чого використовують нетрепонемні тести , що визначають антитіла до ліпоїдним антигенів тканин господаря або збудника в різноманітних модифікаціях.

У рутинно виконують реакцію мікропреципітації (РМП), яка дозволяє виявити антитіла до пошкоджених патогеном клітинам в крові.

Достовірність скринінгу висока, але специфічність невелика, тому тестування підходить для первинного масового обстеження в превентивних цілях.

Чутливість експрес-тестів оцінюється в 78-86% для виявлення первинного сифілісу, 100% для вторинного сифілісу і 95-98% для виявлення третинного сифілісу.

Специфічність – від 85-99%, іноді-менш, що зустрічається при наступних станах:

Крім цього, надлишок жирів у раціоні, вживання спиртовмісних напоїв і прийом деяких ліків можуть привести до ложноложітельним висновками.

Результати скринінгового тестування стають позитивними через 1-2 тижні після утворення шанкра. Нетрепонемні тести дають негативну відповідь через деякий час після лікування. При ВІЛ-статус нетрепонемні антитіла можуть виявлятися довго, іноді протягом усього життя (що підтверджується результатами відповідного рандомізірованнного дослідження).

Інші різновиди нетрепонемних аналізів:

• VDRL,
• плазмореагіновий тест (RPR),
• проба з толуїдиновим червоним,
• реакція зв’язування комплементу з кардіоліпіновим антигеном (РСКк).

Зв’язування комплементу – відповідь імунної системи на інфікування, результат варіюється від негативного (ставиться «-»), до різко позитивного «++++» або 4 плюса.

У початковій стадії первинного сифілісу RW негативна.

Через можливість хибнопозитивних результатів для підтвердження будь-якого позитивного або сумнівного результату нетрепонемних аналізу, використовують трепонемні тести:

• реакція імунофлюоресценції (РІФ);
• гемагглютинация (РПГА),
• імуноферментний аналіз (ІФА) для імуноглобулінів класу G (IgG) і імуноглобуліну М (IgM);
• імуноблотинг;
• ІБТ / РІТ (реакція іммобілізації блідих трепонем).

Трепонемні тести не використовуються для оцінки ефективності терапії.

РИФ на визначення трепонемним АТ класу IgG застосовують після позитивного результату експрес-аналізів (чутливість 84% для первинного сифілісу і 100% при інших стадіях, специфічність 96%). Для діагностики вродженого сифілісу у новонароджених не застосовні.

У деяких лабораторіях використовують «зворотні» скринінгові дослідження.

CDC (Centers for Disease Control and Prevention, США) рекомендує традиційні дослідження, з перевіркою кількісними нетрепонемних тестами, при позитивному результаті проводиться лікування.

• На зібраний матеріал наносять сироватку з міченими флюорохромом антитілами, специфічними до антигену блідої трепонеми, збудник притягує до себе імунні комплекси, через що починає світитися в люмінесцентному мікроскопі.
• До появи гемаглютинації (склеювання) еритроцитів з моменту впровадження блідої трепонеми повинно пройти не менше 4 тижнів.
• Підготовлені еритроцити з фіксованими білковими фракціями патогена взаємодіють з плазмою, якщо є антитіла до сифілісу, відбувається реакція.

Підходить для підтвердження будь-якій стадії захворювання.

В основу покладена реакція антиген-антитіло. Виявляються антитіла різних класів, які можна оцінити кількісно.

1. Отримані результати дозволяють судити про тривалість патологічного процесу, успішності проведеного лікування, імунологічному статусі, активності збудників.
2. Імуноблотинг – різновид ІФА, застосовують для поглибленої діагностики при всіх сумнівних результатах.
3. Чутливість і специфічність близька до 100%, на сьогоднішній день ультрачутлива метод ідентифікації білків.

Спосіб заснований на реакції антиген-антитіло. Антигеном служать блідітрепонеми, культивовані в тестикулах кролика. При взаємодії з антитілами зараженої людини, патогени втрачають рухливість. Реакція оцінюється за допомогою мікроскопії в темному полі.

ІБТ в даний час застосовують через трудомісткість рідше, але аналіз може бути корисний для вирішення спірних питань (хибнопозитивні реакції на сифіліс).

Найбільшу складність представляє діагностика третинного сифілісу, що обумовлюється симптомами з боку серцево-судинної і нервової системи, а також проявами з боку шкірного покриву.

Після збору анамнезу переходять до фізикальному огляду, особлива увага приділяється області геніталій і ануса, слизових оболонок і лімфатичних вузлів. Попередній діагноз вже може бути встановлений. Остаточна верифікація відбувається за допомогою лабораторних аналізів.

Якщо сказати просто про складне, то одні аналізи виявляють збудника сифілісу, а інші відображають реакцію організму на впровадження блідої трепонеми.

Для установки остаточного діагнозу РПГА слід доповнити 1 трепонемним і 1 нетрепонемних аналізом.

Проводяться обов’язкове дослідження на сифіліс кілька разів протягом вагітності.

Направлення на аналіз КСР видається під час першого візиту жінки в консультацію, і за час вагітності тричі виконується обстеження. Пацієнтки з високою групи ризику з обтяженим анамнезом: ІПСШ, асоціальні, залежні та ін. Вимагають особливо пильної уваги.

Якщо результати аналізу позитивні, проводять більш глибоку діагностику, і за показаннями призначають лікування, яке залежить від стадії і клінічних проявів.

Більшість дітей з вродженим сифілісом народжуються у нелікованих матерів, або які отримали терапію занадто пізно.

Трепонемні тести з використанням неонатальної сироватки не рекомендуються через пасивне перенесення антитіл IgG. Всі діти, народжені від матерів з сифілісом, повинні обстежитися за допомогою кількісного нетрепонемних серологічного тесту (RPR або VDRL), виконаного з використанням сироватки крові новонародженого.

Як трактувати результати серологічних досліджень

Реакція мікропреципітації, РІФ і РПГА негативні – норма, позитивні – підтвердження сифілісу:

• Реакція мікропреципітації негативна, інші позитивні – сифіліс в анамнезі після проведення специфічної терапії, або пізня стадія.
• Негативна РИФ при позитивних РПГА і реакції мікропреципітації – результат викликає сумніви, повторна комплексна оцінка.
• Негативний результат РИФ і мікропреципітації, але позитивна РПГА – стан після успішної антибіотикотерапії або хибнопозитивний результат.
• Позитивна РИФ при негативних РПГА і реакції мікропреципітації – рання стадія, проведене лікування або недостовірність результату.
• Позитивна реакція мікропреципітації, не підтверджена ні РПГА, ні РИФ – відсутність сифілісу.

Інструментальна діагностика проводиться в залежності від залучення органів. Наприклад, гранулематозное ураження печінки можна побачити при комп’ютерної томографії черевної порожнини.

Рентгенографія органів грудної клітини у пацієнтів з третинним сифілісом може показати дилатацію аорти. Лінійна кальцифікація по ходу аорти свідчить на користь аортіта.

Ангіографія може бути корисна в діагностиці абдомінальної сифилитической аневризми.

При діагностиці нейросифілісу при відповідних симптомах використовують люмбальна пункція із забором спинномозкової рідини.

Мішина Вікторія, уролог, медичний оглядач

Чому ІБТ позитивний після лікування. Аналіз на сифіліс РИФ

РИФ – реакція імунофлюоресценції  – трепонемний тест. Є одним з найбільш чутливих аналізів на сифіліс. РИФ стає позитивною через 10-20 днів після інфікування, що відносить її до методів раннього виявлення сифілісу.

Показання проведення РИФ:

• Постановка РІФ проводиться у осіб з симптомами сифілісу, при цьому негативними реакціями – РМП, РВ;
• в якості диференціальної реакції у осіб з позитивними реакціями RW, микрореакции і відсутністю симптомів;
• у вагітних при відсутності клінічних проявів і сифілісу в анамнезі.

Методика проведення РИФ:

• При проведенні реакції в сироватку пацієнта додається кров кролика, заражена блідою трепонемой (збудник сифілісу) і флюоресцирующая (світиться) сироватка. Дослідження полягає в спостереженні світіння комплексів під люмінесцентним мікроскопом. Результати реакції інтерпретуються в залежності від інтенсивності світіння від 1+ до 4+, що вказує на наявність сифілісу. Відсутність світіння – негативний результат РИФ позначає, що обстежуваний здоровий. Помилкові результати аналізу зустрічаються вкрай рідко при системних процесах, вагітності і т.д.
• Реакція ставиться в модифікації РІФ-200 і РІФ-АВС (абсорбція).
• Чутливість реакції при первинному сифілісі становить близько 85%
• при вторинному сифілісі – 100%
• при третинному сифілісі – 98-100%.

Негативація РИФ відбувається протягом декількох років після лікування сифілісу. Після проведеної противосифилитической терапії необхідно спостереження за показниками в динаміці.

ІБТ  – реакція іммобілізації блідих трепонем – є самим специфічним аналізом крові на сифіліс. ІБТ високоякісний, дорогий аналіз крові, виконання якого можуть дозволити собі добре оснащені лабораторні комплекси.

ІБТ є основоположною реакцією при прихованих формах сифілісу, нейросифилисе, вісцеросіфілісе. Дозволяє отдифференцировать хибнопозитивні реакції від істинного захворювання на сифіліс.

Постановка реакції заснована на знерухомлення (іммобілізації) збудника сифілісу видоспецифічними антитілами.

Шляхом мікроскопічного дослідження читається результат реакції:

• 0-20% – негативна,
• 21-30% – сумнівна,
• 31-50% – слабоположітельная,
• 51-100% – позитивна реакція.

Тобто до позитивних результатів на сифіліс відносяться ті, де ІБТ понад 50%.

При сифілісі ІБТ стає позитивною досить повільно: в первинний періоді сифілісу вона ще негативна, у вторинному свіжому періоді – позитивна в 50% випадків, у вторинному рецидивному періоді – позитивна в 90-100%, в третинному періоді – позитивна в 99-100%.

Негативація ІБТ здійснюється десятиліттями, тому як критерій достовірності вилікування її використовувати неправомірно, проте динамічне спостереження після проведеного протівосіфілітіческоголікування необхідно.

Проведення реакції ІБТ доцільно не раніше ніж через 30 днів після закінчення лікування. РПГА – реакція пасивної гемаглютинації – відноситься до трепонемним тестів, проводиться в комплексі з нетрепонемних. Використовується для підтвердження діагнозу сифілісу на будь-який його стадії.

Реакцію доцільно проводити через 4 тижні після передбачуваного зараження. При проведенні реакції до сироватці крові пацієнта додають препарат, приготований з еритроцитів тваринного походження, сенсибілізованих антигеном блідої трепонеми – збудника сифілісу.

Суть реакції РПГА полягає в склеюванні (аглютинації) в присутності антитіл до трепонема і освіті агглютіната – фігури, яку спостерігає лікар – лаборант.

Реакція оцінюється за кількістю +:

• 4+ – резкоположітельних результат,
• 3+ – позитивний,
• 2+ – слабопозитивний,
• 1+ – сумнівний,
• – – негативний результат.

При позитивному результаті реакції проводиться кількісна оцінка з визначенням концентрації (титру) антитіл. При прогресуванні сифілісу – титр антитіл стає дедалі більше.

РПГА залишається позитивною протягом десятиліть після лікування сифілісу, тому не може використовуватися як критерій достовірності вилікування. Однак необхідно спостерігати титр антитіл РПГА в динаміці.

Метод має високу чутливість. Результати РПГА можуть бути хибнопозитивні. До таких результатів аналізу можуть призводити хвороби сполучної тканини, деякі інфекції, і т.д.

Лабораторні дослідження плазми крові були і залишаються головним способом діагностики і моніторингу сифілісу.

Цієї хвороби непостійні, а приховані форми взагалі зовні не видно. Серед усього різноманіття серологічних методик, самі достовірні результати надає аналіз на сифіліс РИФ.

РИФ  – це реакція імунофлюоресценції. За діагностичним можливостям ця методика відноситься до непрямих специфічним тестів. Тобто сам збудник виявити за її допомогою не вийде. Але за непрямими ознаками можна зробити обґрунтований висновок про наявність чи відсутність блідої трепонеми в організмі.

Для дослідження потрібні:

• Зразок крові пацієнта. Як правило, використовується венозна, проте є варіанти проведення РИФ з капілярної кров’ю з пальця.
• Типовий, промислового виготовлення, трепонемний антиген. Це особливі білки спірохети, які служать «якорями» для антитіл до бліда трепонема з сироватки хворого.
• Стандартна з білками-імуноглобулінами, які зв’язуються з антитілами крові пацієнта.
• Люмінесцентний мікроскоп.

Ця реакція має дуже високу специфічність і чутливість. Але обходиться недешево і ставиться не так вже й легко. Тому в основному використовується для верифікації діагнозу у сумнівних і хибнопозитивних випадках.

Як проводиться РИФ-діагностика сифілісу?

Алгоритм постановки реакції імунофлюоресценції складається з декількох кроків. У чималому ступені через складність проведення цієї методики, вона не підходить для масових скринінгових досліджень.

Самі кроки такі:

• Отриманим від пацієнта зразком крові / плазми, обробляють предметне скло, на якому знаходиться висушений трепонемний антиген. Його отримують з тканин яєчка кролика, зараженого спирохетой штаму Нікольса.
• Витримавши кілька хвилин, скло промивають дистильованою водою.
• Промитий зразок обробляють спеціальною сироваткою промислового виготовлення, яка містить в собі власні антитіла до людських протитрепонемних антитіл. Імуноглобуліни цієї сироватки заздалегідь помічені спеціальною речовиною, яка під ультрафіолетом світиться жовто-зеленим кольором.
• Потім знову слід промивка.
• Предметне скло поміщається в люмінесцентний мікроскоп і вивчається.

Якщо лаборант спостерігає в окулярі мікроскопа характерне світіння, значить, антитіла до бліда трепонема в крові пацієнта були. Вони зв’язалися з типовим антигеном. А на них, в свою чергу, відреагували мічені люмінофором імуноглобуліни з стандартизованої промислової сироватки.

Аналіз на сифіліс РИФ: достовірність результатів

У серологічної діагностиці сифілісу, дуже важливо отримати достовірний і точний результат.

Щоб підвищити якість даних, робляться певні дії:

• Досліджувана сироватка розлучається в 200 разів (1: 200), щоб уникнути хибнопозитивних реакцій. Тоді кажуть, що проводиться аналіз на сифіліс РИФ 200 .
• В іншому варіанті, при розведенні сироватки 1: 5, додатково використовується спеціальний абсорбент, який збирає на собі «зайві» антитіла, щоб вони не спотворювали результати.

На руку дослідникам грають і розміри трепонем. Великі мікробні тіла спирохет добре помітні при люмінесцентної мікроскопії. Якщо на них «чіпляється» мічені люмінофором білки з сироватки. Використання стандартизованого антигену і сироваток, дозволяє до максимуму підвищити чутливість і специфічність РИФ в діагностиці сифілісу.

Приватні варіанти аналізів РИФ: РИФ абсорбція

Один з альтернативних способів називається РИФ-Абс. Від звичайної методики він відрізняється низьким розведенням досліджуваної сироватки – 1: 5 проти 1: 200, як зазвичай.

У концентрованому зразку міститься дуже багато активних білкових молекул.

Щоб уникнути і підвищити чутливість, сироватку обробляють спеціальним абсорбентом з фрагментів сифилитических спирохет. Сорбент збирає на собі зайве активні антитіла і потім вже зразок обробляють промислової, меченной люмінофором сироваткою. Завдяки такій попередній підготовці, відсіваються всі зайві молекули, які могли б вплинути на результати тесту.

Ставлять її за такими показниками:

• Позитивна на тлі клінічного благополуччя і відсутності ризиків зараження в анамнезі.
• Позитивна РВ у хворих, які страждають хронічними захворюваннями.
• Негативна РВ при появі підозрілих щодо сифілісу симптомів.

Перші позитивні результати з’являються вже на 15-16 день з моменту інфікування. Якщо реакція з позитивною стає негативною, це сигналізує про повне вилікування від сифілісу. Імовірність ложноположительного результату становить менше 0,4%.

Така ситуація може статися при обстеженні онкохворих, алкоголіків, вагітних жінок і страждають розладами імунітету людей.

Певна частка припадає і на технічні помилки, так як постановка досить складна. Бувають випадки, коли необхідно відрізнити вроджену патологію від придбаної. Зробити це можна, якщо пошукати різні види антитіл в крові пацієнта.

Антитіла до сифілісу класу M (IgM), з’являються незабаром після зараження і за часом набагато випереджають IgG. Виявити їх дозволяє аналіз на сифіліс РИФ абсорбції  IgM.

Якщо результати постановки цієї реакції будуть позитивними, то можна говорити про недавнє зараженні. Так випадки реінфекції можна відрізнити від рецидиву або виявити зараження дитини після пологів.

За підсумками такої методики аналізів РИФ, також роблять висновок про ефективність лікування раннього сифілісу.

При підозрі на сифіліс звертайтеся до досвідченого венеролога.

Сифіліс – одна з найбільш поширених венеричних захворювань, яке вражає внутрішні органи, шкірні покриви і центральну нервову систему. Існує можливість зараження сифілісом не тільки статевим, а й побутовим шляхом: через посуд, постільна білизна, предмети особистої гігієни та інші речі, якими користувалися або до яких торкалися хворі люди.

Щоб визначити, хворі ви чи ні, необхідно звернутися до лікаря, який проведе огляд і випише направлення на аналізи. Лабораторна діагностика виявляє збудника сифілісу – бліду трепонем.

Матеріалом для дослідження може бути як плазма крові, так і виділення з шкірних висипань, іноді зразки, отримані при пункції лімфатичних вузлів.

Але все ж основним видами лабораторної діагностики сифілісу є серологічні аналізи, зокрема, аналіз крові на сифіліс.

реакція Вассермана

Визначає Антиліпідний антитіла (реагіни). До сироватки крові пацієнта додають сифілітичні антигени, що утворюють з реагинами імунний комплекс, здатний адсорбувати і пов’язувати комплемент.

Якщо такий комплекс утворюється, то руйнування еритроцитів (гемоліз) не відбувається, і вони випадають в осад (позитивна реакція).

Якщо в сироватці пацієнта немає реагинов, то відбувається гемоліз, і еритроцити в осад не випадають (негативна реакція).

RPR (Rapid Plasma Reagin)

Або реакція мікропреципітації з кардіоліпіновим антигеном – це скринінговий метод діагностики сифілісу. Дана реакція певною мірою може розглядатися як більш сучасна модифікація реакції Вассермана.

Основним показанням до проведення цього тесту є первинне обстеження на сифіліс, медичні огляди, контроль ефективності лікування.

Позитивний результат вимагає проведення інших, більш точних тестів для підтвердження діагнозу.

Імуноферментний аналіз (ІФА)

Один з найперспективніших методів лабораторної діагностики сифілісу. Його принцип – виявлення специфічного комплексу антиген-антитіло, який утворюється при з’єднанні сифилитических антигенів, абсорбованих на твердому носії, з антитілами досліджуваної сироватки крові.

В даний час найбільш поширеним є непрямий варіант ІФА, на заключному етапі якого використовуються антитіла до імуноглобулінів людини, кон’юговані з пероксидазою хрону або іншими ферментними маркерами.

Вимірюється фарбування кінцевих продуктів цієї реакції, яка залежить від кількості пов’язаних антитіл сироватки.

Реакція імунофлюоресценції (РІФ)

В ході реакції імунофлюоресценції  (РІФ) визначається інтенсивність світіння блідих трепонем в препараті, яка виникає тільки в присутності антітрепонемних антитіл в сироватці крові. Реакція проводиться з сироваткою в різному розведенні (у 10 і 200 разів).

Реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ)

Найбільш специфічний діагностичний тест на сифіліс. У сироватці крові хворих проводиться визначення відеоспеціфічних антитіл (иммобилизинов), які паралізують блідітрепонеми в присутності комплементу.

За допомогою мікроскопа проводиться підрахунок частки втратили рухливість (іммобілізованих) блідих трепонем.

Кров методом ІБТ досліджують не раніше ніж через 2 тижні після закінчення прийому антибіотиків та інших лікарських засобів.

Дослідження крові методами ІБТ і РИФ виконують для діагностики прихованого сифілісу. РИФ (10-ти кратне розведення сироватки) дозволяє поставити діагноз навіть у тих пацієнтів, в дослідженнях яких бліда трепонема не виявляється.

Реакція пасивної гемаглютинації (РПГА)

З’єднання блідих трепонем сироватки крові з обробленими спеціальними методами баранячими еритроцитами.

При наявності в сироватці крові збудника сифілісу відбувається аглютинація (склеювання і подальше осадження) еритроцитів.

Реагенти вносять в лунки спеціальних пластин, про результат реакції судять по фарбуванню. Агглютінати еритроцитів має темно-червоний колір і форму плями або кільця.

Не рекомендується здавати кров після прийому алкоголю, лікарських препаратів, а також під час менструального циклу.

Аналіз на сифіліс РИФ

Для виявлення хвороби використовують різні методики і біоматеріали. На ранніх етапах сифіліс визначають за допомогою бактеріоскопічного тесту. Зразки досліджують під мікроскопом. Прилад дозволяє виявити штами збудника. Пізніше проводять серологічні аналізи. Завдяки їм, в пробах виявляють антигени і антитіла до хвороби.

Способи визначення статевої інфекції поділені на 2 категорії:

• Прямі, що виявляють патогенний мікроорганізм. До них відносять: темнопольная мікроскопія, RIT-аналіз (інфікування кроликів біоматеріалом для дослідження), метод ПЛР – полімеразної ланцюгової реакції (з його допомогою знаходять генетичні елементи збудника).
• Непрямі (серологічні) дозволяють виявити антитіла до патогену. Вони продукуються імунною системою, як відповідна реакція на зараження.

Серологічні методики поділені на 2 категорії: трепонемні і нетрепонемні.

1. Нетрепонемні, що включають: тест з толуїдиновим червоним, аналіз РСК, RPR- тест, дослідження крові експрес-методом РМП.
2. Трепонемні, що об’єднують: імуноблотинг, РСК-тест, РІТ-аналіз, дослідження РИФ, РПГА-тест, ІФА-аналіз.

Щоб виявити бліду трепонем – патогена, який виглядає, як спіраль і викликає сифіліс, беруть проби:

• венозної крові;
• ліквору (секрету з спинномозкового каналу);
• вміст лімфатичних вузлів;
• тканини виразок.

Якщо необхідно провести тести на виявлення сифілісу, кров здають не тільки з ліктьової вени, але і з пальця. На вибір біоматеріалу і спосіб дослідження впливає тяжкість перебігу інфекції і оснащеність діагностичного центру.

Діагностика сифілісу має деякі особливості і відрізняється від діагностики інших бактеріальних інфекцій. Складну будову і антигенні властивості блідої трепонеми обумовлюють помилки в інтерпретації результатів серологічних реакцій.

Здати аналіз крові на сифіліс пропонують 3 основних груп пацієнтів:

1. Скринінг і диспансеризація груп населення (в тому числі і вагітність, постановка на облік в жіночій консультації, надходження на роботу і оформлення медкнижки і так далі).
2. Скринінг в групах ризику (незахищені статеві контакти з людиною, інфікованою сифілісом, особи після примусових сексуальних контактів, ВІЛ-інфіковані і так далі).
3. Особи, які мають симптоми захворювання, або особи з підозрою на сифилитическую інфекцію.

Всі лабораторні методи умовно поділяють на прямі і непрямі.

1.1. прямі методи

1. Ідентифікація Treponema pallidum в темному полі (темнопольная мікроскопія).
2. Зараження піддослідних тварин (культивування в лабораторних тварин).
3. ПЛР (полімеразно-ланцюгова реакція).
4. ДНК-зонд або гібридизація нуклеїнових кислот.

1.2. непрямі методи

Серологічні реакції – це методи лабораторної діагностики, що базуються на виявленні антитіл (скорочено АТ) до антигенів блідої трепонеми (скорочено АГ). Вони мають основне значення для підтвердження діагнозу.

1. Нетрепонемні тести:
   • Реакція Вассермана (РСК);
   • Реакція мікропреципітації (МР, РМП) і її аналоги, які наведені нижче;
   • Тест швидких плазмових реагинов (RPR, РПР);
   • Тест з червоним толуїдини і сироваткою (TRUST);
   • Нетрепонемних тест Лабораторії дослідження венеричних хвороб – VDRL.
2. Трепонемні тести:
   • Р-ція іммобілізації Treponema pallidum – ІБТ / РІТ;
   • Р-ція імунофлюоресценції – РІФ, FTA (розведення сироваток РИФ-10, РІФ-200, РІФ-абс);
   • Р-ція пасивної гемаглютинації (РПГА, ТРПГА, TPHA);
   • Імуноферментний аналіз (ІФА, EIA);
   • Імуноблотинг.

Ці методи зводяться до виявлення особливостей гістоморфологіі сифилитических проявів. Увага приділяється тонкощам будови твердого шанкра. Однак, диференціальна діагностика інфекції за допомогою гістології певні складнощі. Гістоморфологія використовується з іншими лабораторними та клінічними тестами.

діагностика сифілісу

1.2. непрямі методи

У таблиці 1 нижче ми привели можливі результати аналізів і їх розшифровку. Як можна бачити в таблиці, основне значення при розшифровці має комплексна оцінка тестів.

Оцінка реактивності тестів виконується також «хрестами»:

1. Максимальний відповідь (різко позитивна проба) позначається за допомогою 4-х хрестів.
2. Позитивна проба позначається за допомогою 3-х хрестів.
3. Слабопозитивний реакцію позначають двома хрестами.
4. Один хрест свідчить про сумнівне і негативному результаті.
5. Негативна відповідь маркують знаком «мінус».

Проблема оптимізації лабораторної діагностики сифілісу не втратила своєї актуальності до теперішнього часу. Сучасні методи діагностики, незважаючи на прагнення вчених привести діагностику до максимально високих показників чутливості і специфічності, вимагають контрольної перевірки та індивідуального підходу.

Особливістю сифілітичної інфекції є феномен серорезистентности, який так і не отримав наукового пояснення. Діагноз виставляється після повноцінного обстеження хворого епідеміологічними, клінічними, лабораторними методами.

На тлі економіко-технічного розвитку медицини спостерігається і прогрес в розробці нових критеріїв діагностики сифілісу. Все це дозволить швидко, успішно і безпомилково лікувати пацієнтів.

Сифіліс можна діагностувати за аналізом крові і за симптомами при їх наявності. Щоб отримати більш точний результат, необхідно правильно здати аналіз. Кров треба здавати вранці і виключно на голодний шлунок. Так, щоб останній прийом їжі був не менш ніж за 8 годин до здачі аналізу. Напередодні аналізу не можна вживати алкоголь і будь-яку рідину крім води, також забороняється палити.

У сучасних лабораторіях є можливість для проведення декількох видів серологічних аналізів крові, які виявлятимуть сифіліс:

• Аналіз крові RW дозволяє виявити присутність збудника в організмі людини і його активність, а також визначити ефективність призначеного лікування. Такий аналіз іноді видає помилкові результати.
• Аналіз крові РИФ більш чутливий і дозволяє визначити захворювання на більш ранніх стадіях. Він підходить для діагностики захворювання в прихованому періоді перебігу.
• Аналіз ІФА дозволяє визначити наявність в організмі антитіл в бліда трепонема – збудника сифілісу.
• Аналіз РПГА проводиться для підтвердження стадії захворювання. Як самостійний діагностичний тест він не використовується, а тільки в комплексі з іншими.
• Забір крові ІБТ використовується для розпізнавання хибнопозитивної реакції Вассермана.

Як здати аналіз

Відправляє пацієнтів на аналіз лікар-венеролог. Приватні лабораторії роблять анонімні дослідження на сифіліс за бажанням клієнта. Для здачі тесту в них не потрібно направлення лікаря.

Правила проведення дослідження:

• Кров в лабораторії беруть вранці на порожній шлунок (їдять після процедури). До аналізу дозволено пити тільки воду.
• За 2 доби до обстеження заборонено: харчуватися жирною їжею і вживати спиртне.
• Кров беруть з пальця або вени.
• Скільки триває дослідження? Зазвичай не більше доби. Розшифровку аналізів на сифіліс отримують у лаборантів або лікуючого лікаря.
• Скільки дійсний тест? Після 3 місяців результати аналізів втрачають силу. Їх здають знову.

Якщо розшифровка аналізу показує, що тест позитивний, необхідно відвідати венеролога, який призначить додаткове обстеження для точного підтвердження діагнозу і підбере схему необхідного лікування.

Імуноферментний аналіз (скорочено ІФА) базується на специфічній реакції антиген-антитіло. Біологічний матеріал (сироватка крові пацієнта, ліквор) вносять в лунки, на твердій поверхні яких фіксовані антигени блідої трепонеми. Досліджуваний матеріал инкубируют, потім відмивають антитіла, які не зв’язалися з антигенами.

Ідентифікація отриманого комплексу здійснюється на етапі ферментації за допомогою імунної сироватки, міченої ферментом. При хімічної реакції фермент забарвлює отримані комплекси. Інтенсивність забарвлення залежить від кількості специфічних антитіл в крові пацієнта і фіксується спектрофотометром.

Чутливість ІФА складає більше 95%. Метод використовується в автоматизованому режимі для дослідження декретіруемих груп населення: донорів, вагітних і інших, для уточнення діагнозу при позитивних і хибнопозитивних нетрепонемних тестах.

Всі серологічні аналізи крові на сифіліс ділять на дві великі групи: неспецифічні (це аналіз крові RW) і специфічні (аналізи РНГА, РІФ, ІФА, РІБТ).

• Неспецифічні тести дають позитивний результат лише коли людина хвора, а після одужання вони будуть давати негативний результат.
• Специфічні тести дозволяють визначити в крові людини антитіла до хвороби. Вони можуть давати позитивні результати і після лікування, тому їх рідко використовують в якості самостійних діагностичних тестів.

Щоб отримати максимально точні результати зазвичай використовують кілька різних тестів, тоді розшифровка аналізу крові на сифіліс займає трохи більше часу, але і результативність стає вище.

Реакція Вассермана або RW може показати позитивний результат приблизно на 5-8 тижні після зараження, але у деяких хворих це відбувається пізніше.

У міру надходження збудників в кров титр її зростає. Максимуму вона досягає при вторинному свіжому сифілісі.

Потім відбувається поступове зниження титру антитіл, а при пізніх формах захворювання реакція Вассермана нерідко буває негативною.

Якщо аналіз показує різке зниження титру антитіл під час лікування, то це свідчить про його ефективності. Зазвичай результат розшифровки аналізу крові на сифіліс видають у вигляді цифри:

• 4 – різко позитивний,
• 3 – позитивний,
• 2 або 1 слабопозитивний або сумнівний,
• значок «-» позначає негативний результат аналізу.

Головним недоліком аналізу RW є його недостатня специфічність. Він досить часто дає хибнопозитивні результати у пацієнтів з іншими захворюваннями. Наприклад, такий аналіз може бути позитивними у пацієнтів з різноманітними коллагенозами (червоний вовчак, склеродермією, ревматоїдний артрит і т.д.), деякими інфекційними захворюваннями, наприклад проказою, мононуклеоз, малярією, кір тощо., А також із захворюваннями печінки, злоякісними новоутвореннями, інфарктами міокарда.

Хибно позитивні результати бувають і у людей, що зловживають алкоголем і наркотиками, а також у абсолютно здорових людей.

Тому при отриманні позитивного аналізу на сифіліс зазвичай рекомендують провести додаткові дослідження за допомогою трепонемним тестів.

До трепонемним тестів відноситься ІФА або метод імуноферментного аналізу. При розшифровці аналізу крові даним методом можна отримати інформацію про антитіла до сифілісу, а також про їх титр і приналежності до певного класу імуноглобулінів.

Щоб отримати максимально точний результат аналізу на сифіліс рекомендується проводити один нетрепонемних тест (RW) і два трепонемним. Якщо всі три аналізу дадуть позитивний результат, то можна говорити про наявність захворювання у пацієнта.

Якщо є найменша підозра на наявність даного венеричного захворювання, необхідно негайно звернутися до лікаря. Він порекомендує здати аналіз на сифіліс і дасть необхідний напрям.

Здати такий аналіз можна абсолютно безкоштовно в будь-якій поліклініці з обладнаної лабораторії.

Якщо ж хочеться зробити це анонімно, то можна відвідати приватну лабораторію, де такий аналіз роблять за невелику плату.

Щоб отримати максимально точні результати аналізу необхідно кров здавати натще з ліктьової вени. При цьому ні в якому разі не можна вживати алкоголь, оскільки він може призвести до того, що ви помилково отримаєте позитивний результат аналізу. Крім того, може досліджуватися виділення твердого шанкра або пунктат лімфатичних вузлів.

І пам’ятайте: позитивний аналіз на сифіліс – не вирок. Сьогодні це захворювання успішно лікується і чим раніше воно буде виявлено, тим вище ймовірність успішного результату.

Зараження лабораторних тварин

Висока чутливість кроликів до Treponema pallidum (близько 99,9%) дозволяє застосовувати їх в діагностиці сифілітичної інфекції.

Повернемося до трепонемним і нетрепонемних тестів, так як вони використовуються найчастіше. Розглянемо їх переваги та недоліки, а також помилки в інтерпретації результатів.

Аналіз ІФА на сифіліс – докладний опис в повному огляді

ІФА – імуноферментний аналіз – є одним з найпрогресивніших методів діагностики сифілісу. Він виявляє ознаки присутності збудника захворювання на різних стадіях останнього. В основі аналізу лежить виявлення специфічних антитіл, які з’являються в крові хворого при впровадженні в організм блідою трепонеми (бактеріального збудника).

Метод ІФА працює не тільки для групи захворювань, що передаються статевим шляхом. В рівній мірі він застосуємо і для діагностики різних хвороб інфекційного характеру.

Принцип проведення аналізу був розроблений ще в 60-х роках минулого століття. Однак активно використовуватися він почав тільки через 20 років.

Зараз ІФА застосовується для діагностики сифілісу, СНІДу, туберкульозу та багатьох інших хвороб. Для виявлення антитіл використовуються спеціально розроблені ферменти, активно реагують на специфічні білки крові.

В яких випадках призначають ІФА?

Хворий може сам прийти в клініку для проведення аналізу, якщо у нього присутні підозрілі симптоми (характерні висипання на тілі, підвищена температура, болі в м’язах і ін.). Однак на певних стадіях недугу не проявляється настільки явно. Через кілька тижнів після інфікування симптоми зникають, і пацієнт може помилково вважати себе видужалою. З цієї причини існує ряд випадків, коли аналіз ІФА проводиться в обов’язковому порядку:

1. При влаштуванні на роботу на підприємства, де є контакт з великою кількістю людей, продуктами харчування, дитячими та медичними товарами.
2. При постановці на облік вагітної. Хвороба передається від хворої матері немовляті, тому важливо її вчасно виявити.
3. При донорство крові. Перед тим як здавати кров, донор повинен перевірити її на наявність небезпечних інфекцій, в тому числі і сифілісу.
4. Під час підготовки до операції. Проведення такого роду втручань на увазі прямий контакт з кров’ю хворого. Це може бути небезпечно для медперсоналу і інших пацієнтів клініки.
5. При виявленні симптомів у одного із статевих партнерів. У цьому випадку другий партнер також зобов’язаний здати кров на пробу.
6. При проходженні військової служби, а також у разі тюремного ув’язнення. Обидві ситуації припускають тривалий контакт з великою кількістю людей. Оскільки недуга передається не тільки статевим, а й контактно-побутовим шляхом, будь-яка людина з оточення інфікованого знаходиться під загрозою.

Як проводиться?

Головна особливість ІФА – висока точність даних. Дозволяє не просто виявити антитіла, а й визначити їх кількісне співвідношення.

Це означає, що імуноферментний аналіз дозволяє з 99,99% -ною вірогідністю виявити хворобу і одночасно визначити, на якій стадії розвитку хвороба в даний момент знаходиться.

При проведенні ІФА у пацієнта беруть кров з вени. Потім її особливим чином готують і розміщують на полистироловой панелі з безліччю лунок. При діагностиці в сироватку крові додають спеціальні ферменти, які при наявності антитіл / антигенів недуги утворюють з ними міцні з’єднання.

Результатом освіти таких з’єднань стає зміна кольору плазми крові в лунці (з безбарвного – на яскраво-жовтий). Працівникові лабораторії досить візуально оцінити результат, щоб зрозуміти, що на панелі – кров хворого.

трактування результатів

При ІФА на сифіліс оцінюють наявність 3 класів антитіл (імуноглобулінів): A, M і G. Ці речовини утворюються в крові інфікованої людини в строго визначеної послідовності:

1. Наявність імуноглобуліну A вказує на те, що з моменту зараження блідою трепонемой пройшло більше місяця.
2. Антитіла M виявляються при тривалому присутності інфекції в організмі. Також вони можуть бути реакцією на загострення хронічної хвороби.
3. Імуноглобулін G організм виробляє на самому піку захворювання, а також після вже проведеного лікування.

Інтенсивність забарвлення плазми крові в яскраво-жовтий колір при проведенні ІФА безпосередньо вказує на кількість антитіл. Якщо колір плазми злегка жовтуватий, результати ставлять під сумнів і процедуру повторюють. При негативному результаті колір плазми не змінюється і залишається прозорим.

Хибнопозитивний результат ІФА

Протягом усього життя людині досить часто доводиться робити ІФА на сифіліс (перед влаштуванням на роботу та ін.). Позитивний результат завжди стає стресом. Однак не варто панікувати завчасно! Іноді ІФА може дати хибнопозитивний результат. В цьому випадку є сенс провести повторне обстеження.

Фахівці не радять турбуватися після першого ж позитивного результату ІФА, оскільки це дослідження спрямоване на виявлення не самою блідою трепонеми, а антитіл, які організм виробляє у відповідь на атаку патогенних бактерій. ІФА – аналіз з високою точністю (ймовірність похибки менше 1%). При наявності сумнівів лікарі не ставлять діагноз відразу ж, а пропонують пацієнту здати кров ще раз.

Хибнопозитивний відповідь ІФА можливий при хворобах:

• сполучної тканини, суглобів (васкуліт, ревматоїдний артрит та ін.);
• серця (головним чином це стосується запальних захворювань: міокардиту, ендокардиту);
• ендокринної системи (діабет);
• інфекційних (гепатит, туберкульоз та ін.).

Хибнопозитивний результат може бути при вагітності або в тому випадку, якщо незадовго до ІФА пацієнту була проведена вакцинація. Змінити підсумки аналізу не в кращу сторону здатне і вживання алкоголю, наркотиків.

У досить великій кількості випадків позитивну реакцію дає перевірка крові пацієнтів, які вже пройшли лікування. У 10% вилікуваних позитивна реакція залишається на все життя, оскільки в крові постійно циркулює певна кількість антитіл як імунна відповідь на виникле одного разу захворювання.

помилково негативні результати

Поряд з хибнопозитивним можлива і помилково негативні реакція. На самому початку хвороби, коли трепонема тільки потрапила в організм, антитіла виробляються в недостатньому для виявлення кількості. Ферменти можуть їх не зафіксувати, тому підсумки ІФА виявляються негативними.

При наявності підозр на сифіліс (пацієнт мав незахищений статевий акт, тим чи іншим чином контактував з можливими хворими та ін.) Проводиться повторний аналіз.

Обстеження контактних осіб

Існує певний протокол дій на той випадок, якщо у пацієнта зі 100% -ної достовірністю було виявлено недуга. В першу чергу обстеження проходить його статевий партнер: чоловік, дружина, інші особи, які вступали з зараженим в інтимний зв’язок. В цьому плані медики категоричні. Обстеження сексуальних партнерів є обов’язковим, щоб уникнути поширення небезпечного захворювання.

Лікування проходять всі члени сім’ї хворого, навіть якщо їх аналізи показали негативний результат. Пам’ятаємо: сифіліс – гострозаразних хвороба, що передається контактно-побутовим шляхом. Діти і інші члени сім’ї можуть отримати трепонему під час користування санвузлом, загальними рушниками, посудом.

Дії після підтвердження діагнозу

Як тільки дані ІФА на сифіліс підтвердилися, інфікований і контактували з ним особи проходять терапію антибіотиками. Всі рекомендації лікаря – дозування, періодичність прийому ліків – необхідно дотримуватися в точності!

На час лікування працюючим громадянам видається довідка із зашифрованим згідно МКБ-10 діагнозом. Після повного лікування медична книжка продовжується. Видужалий працівник може приступати до своїх безпосередніх обов’язків. Роботодавець не має права відмовити йому у відновленні на робочому місці.

Такі основні дані по проведенню ІФА. Заразилися потрібно пам’ятати: постановка діагнозу не ставить хрест на всій подальшій життя хворого. Зараз існують ефективні препарати, що дозволяють надійно виліковувати це захворювання. Вчасно проведені обстеження та лікування дозволяють уникнути найнебезпечніших наслідків недуги і захистити від нього інших членів суспільства.

Діагностика сифілісу: аналізи і їх розшифровка

Дуже важливо вчасно розпізнати хворобу. У певний момент людини можуть направити на аналіз крові КСР, який дозволяє визначити, чи є сифіліс у людини або ж його немає.

Коли призначають аналіз крові на КСР

Існує кілька свідчень, коли необхідно здати кров на наявність або відсутність сифілісу в організмі людей.

До таких показань відносять:

• Безладні статеві зв’язки (як випадкові, так і немає) .Не завжди люди під час статевого акту оберігаючи, і тому ризик захворіти на сифіліс підвищується в кілька разів.
• Підготовка перед операцією, коли лікарям дуже важливо знати про загальний стан організму людини і про те, чи потрібно робити якісь зайві заходи безпеки, щоб не заразиться самим.
• Вагітність, під час якої дуже важливо провести повну діагностику організму майбутньої мами і зрозуміти, наскільки великі шанси виносити малюка. Та й до того ж сифіліс становить небезпеку для дитини, і тому, в деяких випадках це може спонукати до переривання вагітності.
• Планування вагітності. Даний процес розрахований на те, що майбутні батьками свідомо проходять обстеження, щоб підійти до питання зачаття серйозно. Під час цього заходу виявляються всі можливі хвороби, а також наявні інфекції, які потрібно відразу ж лікувати.
• Виразки на статевих органах, які можуть свідчити про наявність серйозного і небезпечного захворювання.
• Рясні виділення зі статевих органів різного характеру.
• Збільшення лімфатичних вузлів, переважно в області паху.
• Висип на тілі, яка може супроводжуватися сильним свербінням.
• Хворобливі відчуття в області кісток.

Також, крові на сифіліс (КСР) здається при кожному профілактичному огляді з однією метою, щоб вчасно виявити проблему.

Підготовка і розшифровка аналізу крові

Дуже важливо дотримати всі рекомендації лікарів по підготовці до здачі аналізу. Від цього іноді залежить достовірність отриманих результатів.

Пацієнту, який отримав направлення на аналіз КСР необхідно утриматися від вживання їжі мінімум за 8 (а бажано за 12) годин до самої процедур, так як іноді це може привести до отримання або ложноположительного, або помилково негативні аналізу.

Якщо ж у людини немає змоги не їсти такий тривалий період часу (наприклад, діабетики або вагітні жінки), то необхідно виключити чай, кава, будь-які соки. Пити дозволяється тільки просту воду (кип’ячену або фільтровану).

У той момент, коли вчені отримали такий спосіб діагностики сифілісу, стало можливим виявити його навіть при прихованому перебігу.

Реакція Вассермана має особливе значення для будь-якого венеролога, бо:

• Дозволяє визначити навіть момент зараження, звичайно, не з точністю до днів, але приблизний проміжок і термін хвороби цілком.
• Можна визначити наявність сифілісу навіть в тому випадку, якщо він протікає в прихованій формі.
• Це єдиний нормальний показник того, наскільки ефективно протікає лікування і чи є позитивна динаміка.

Також, на результати аналізу орієнтується лікар під час проведення профілактичних заходів в осередку інфекції, що теж важливо. Пацієнти звикли до того, що результат аналізу може бути або позитивним, або ж негативним. Але з сифілісом справа йде трохи інакше.

Негативний результат може бути як при повній відсутності інфекції, так і при ранньому первинному або пізньому третинному сифілісі.

Що ж стосується позитивного результату, то він говорить про те, що інфекція присутня в організмі (в залежності від точності показників), або ж про те, що людина знаходиться на стадії одужання або ж в перший рік після лікування. Тобто, отримуючи результат аналізу не можна з точністю сказати про те, чи здоровий чоловік або де немає. Особливо якщо мова йде про пацієнтів, що перебувають на лікуванні.

У тому випадку, якщо людину не мучили симптоми, і він не проходив ніякого лікування, і при цьому аналіз його негативний, то це говорить про повну відсутність хвороби.

хибнопозитивна реакція

Є ряд захворювань і причин, через які аналіз крові КСР може показати хибнопозитивний результат. Звичайно, це піддає в шок людини, але не говорить про безнадійність.

Хибнопозитивний результат може бути в наступних випадках:

• Під час вагітності, так як організм в цей момент піддається сильному навантаженню.
• При цукровому діабеті.
• При туберкульозі будь-якої форми.
• При наявності злоякісних пухлин в організмі (онкологія).
• При зловживанні алкогольними напоями.
• При вірусному гепатиті, коли печінка працює не так, як того вимагає організм.
• При пневмонії, особливо у важких формах її перебігу.

Також, хибнопозитивний результат може спостерігатися у людей після вакцинації, тому при отриманні такого результату, потрібно сказати про це лікаря. Що ж стосується помилково негативні результати, то таке зустрічається дуже рідко.

КСР аналіз крові є дуже важливим методом діагностики, який дозволяє вчасно виявити хворобу і почати лікування.

Звичайно, не завжди хвороба виявляється на ранній стадії. Саме тому щороку, особливо якщо були випадкові статеві зв’язки, необхідно здавати аналіз крові, щоб не доводити хворобу до важкої стадії, вилікується на якій вже проблематично.

трепонемні тести

Реакція іммобілізації блідих трепонем (РІБТ). Обов’язковою умовою є виключення перед обстеженням прийому хворим антибіотиків, які надають токсичну дію на блідітрепонеми, викликаючи їх неспецифічну знерухомлення.

Позитивні результати РІБТ виявляються приблизно з середини вторинного свіжого періоду сифілісу, і можуть тривалий час зберігатися після проведеного лікування. При необхідності метод використовують для виявлення АТ в спинномозковій рідині, це дослідження відрізняє висока специфічність, але низька чутливість (близько 40%).

ІБТ мало придатна для діагностики ранніх форм сифілісу через пізнє (не раніше 8-9 тижнів від моменту зараження) появи АТ-иммобилизинов; метод може давати хибно позитивні результати, особливо у хворих з аутоімунною патологією, злоякісними захворюваннями, діабетом.

Крім того, ІБТ – досить складний, трудомісткий і дорогий аналіз, що вимагає високої кваліфікації персоналу і наявності віварію, в зв’язку з чим в останні роки він використовується лише в окремих лабораторіях.

В діагностиці ІБТ застосовується як реакція-арбітр при розбіжності результатів інших серологічних досліджень, для диференціювання хибнопозитивних результатів і при встановленні діагнозу пізніх форм сифілісу.

Реакція зв’язування комплементу з трепонемним антигеном (РСК з ТА) .Чувствітельность методу – близько 80%, специфічність – 98%.

Метод входив до складу комплексу стандартних серологічних реакцій на сифіліс, регламентованого наказом МОЗ СРСР № 1161 від 02.09.1985 «Про вдосконалення серологічної діагностики сифілісу».

В даний час використання цієї реакції, як і РСК з кардіоліпіновим антигеном, обмежена окремими лабораторіями.

Реакція імунофлуоресценції (РІФ) . Для діагностики сифілісу використовують кілька модифікацій РИФ: РИФ-ц – для виявлення АТ в спинномозковій рідині, РІФ-200 (тестируемую сироватку перед реакцією розводять в 200 разів); РИФ-абс (РІФ з абсорбцією), IgM-РИФ-абс (для визначення АТ IgM).

За чутливості і специфічності РИФ-абс не поступається РІБТ, але виконання цього методу набагато простіше. Результати РИФ-абс стають позитивними з 3-го тижня після зараження (до появи твердого шанкра або одночасно з ним), це метод ранньої діагностики сифілісу.

Нерідкі позитивні результати дослідження через багато років після повноцінного лікування раннього сифілісу, а у хворих з пізнім сифілісом – протягом десятиліть.

Показання для виконання РИФ-абс:

• позитивні результати НТТ у вагітних при відсутності клінічних і анамнестичних даних, що свідчать про сифіліс;
• обстеження осіб з різними соматичними та інфекційними захворюваннями, при яких відзначають позитивні результати НТТ;
• обстеження осіб з клінічними проявами, характерними для сифілісу, але з негативними результатами НТТ;
• рання діагностика сифілісу;
• в частині випадків – як критерій успішності протівосіфілітіческоголікування: перехід позитивної РИФ-абс в негативну після лікування є 100% критерієм вилікування сифілісу.

IgM-РИФ-абс застосовують для роздільного виявлення АТ класів Ig, що представляє особливий інтерес при діагностиці вродженого сифілісу, коли АТ до трепонема, синтезовані в організмі дитини, представлені IgM, а АТ IgG мають материнське походження. Показаннями до проведення цього дослідження є: діагностика вродженого сифілісу; оцінка результатів лікування раннього сифілісу.

РИФ має високу чутливість (98,5%) і специфічність (99,6%) практично при всіх формах сифілісу. Недоліками РИФ є: неможливість автоматизації дослідження і обліку результатів; труднощі приготування якісного антигену з суспензії блідих трепонем, отриманих з яєчка зараженого кролика; суб’єктивізм в оцінці результатів.

Реакція пасивної гемаглютинації (РПГА). Зіставлення результатів, отриманих при використанні РПГА і ІБТ, РІФ-абс, КСР, МРП показало високу чутливість і специфічність РПГА при діагностиці сифілісу, збігається з результатами РІФ-абс.

РПГА може бути виконана в якісному і кількісному варіантах, існують їх макро- і мікромодіфікаціі. Кількісний метод РПГА дозволяє оцінити концентрацію специфічних трепонемним АТ в крові. Титри від 1: 640 і нижче характерні для пацієнтів, які лікувалися з приводу сифілісу в минулому. Більш високі титри – зазвичай для активної нелеченной інфекції.

Позитивні результати РПГА, як правило, відзначають через 3 тижні після появи твердого шанкра і далі у пацієнтів, які перенесли сифіліс, протягом багатьох років, нерідко довічно.

Чутливість РПГА становить 76% при первинному сифілісі; 100% при вторинному сифілісі; 97% при прихованому сифілісі; 94% при пізньому сифілісі. Специфічність РПГА вище, ніж специфічність РИФ-абс, становить 99%.

Завдяки співвідношенню високої специфічності, чутливості, простоти виконання, стандартизації реагентів серед трепонемним тестів для серодиагностики сифілісу РПГА стабільно займає лідируюче місце в клінічній практиці в світі.

Особливі переваги ІФА полягають:

• у високій чутливості і специфічності методу;
• автоматизації постановки реакції;
• високого ступеня стандартизації;
• можливості дослідження великої кількості зразків сироваток;
• в кількісному обліку та об’єктивної документації отриманих результатів;
• можливості одночасного визначення титру протитрепонемних АТ різних класів (IgG і IgM) в одному зразку;
• придатності для ранньої діагностики сифілісу і діагностики вродженого сифілісу;
• в зручності застосування для тестування крові в службі переливання крові;
• застосовності як підтверджуючий специфічного трепонемная тесту.

Чутливість ІФА 98-100%, специфічність 96-100%.

До недоліків ІФА можна віднести: непридатність для дослідження одиничних зразків; більш тривалий термін до отримання результату, і менший термін придатності ІФА-наборів, наприклад, у порівнянні з РПГА.

Імунний блот (ІБ). Одним із сучасних методів діагностики сифілісу є ІБ для визначення АТ IgG або IgM до певних АГ блідої трепонеми.

Метод має високу чутливість (до 100%,), специфічність (98%) і відтворюваністю (100%). Дослідження дає можливість вивчення спектру АТ відразу до декількох АГ T.pallidum, застосування високоочищених рекомбінантних і пептидних АГ, що знижують до мінімуму неспецифічну реактивність сироваток.

Все це визначає можливість переваги застосування методу ІБ перед іншими трепонемная тестами для верифікації діагнозу сифілісу в складних випадках, зокрема, для діагностики сифілісу в другій половині інкубаційного періоду, прихованого вродженого сифілісу в перші дні життя дитини, для виявлення прихованого сифілісу у осіб зі слабким гуморальним відповіддю, а також для диференціювання хибнопозитивних результатів інших тестів.